液相色譜柱使用問題大解析四

1、用的是四元梯度泵   A50%甲醇  B50% 水  經常出現停或進氣泡這是什么原因？
答：水/甲醇比例在55：45時，黏度和柱壓有個極大值。50：50接近了這個極值，柱壓是比較高的，但影響柱壓最大的還是填料粒徑和色譜柱內徑，你這個實例中不知用的什么規格的色譜柱？系統壓力高，可能會因溶劑泵中的過濾頭供液速度跟不上而導致氣泡進入系統，停機也應該是因為氣泡進入壓力下降的原因，可考慮更換液體通量更大的過濾頭。

2、資料顯示：在正常條件下，填料粒度＞20µm時，干法填充制備柱較為合適；顆粒＜20µm時，濕法填充較為理想。填充方法一般有4種①高壓勻漿法，多用于分析柱和小規模制備柱的填充；②徑向加壓法，Waters專利；③軸向加壓法，主要用于裝填大直徑柱；④干法。柱填充的技術性很強，大多數實驗室使用已填充好的商品柱。為什么以20um為分界點？填料方法的前三種都是濕法嗎，能不能對四種填充方法做一個簡短的說明？

3、想請您具體說明一下反沖色譜柱的方法，是不連檢測器嗎？
答：反沖就是將柱子反向連到系統中。因為有污染物反沖出來，當然不連檢測器，出液端直接接到廢液瓶就可以。

4、網上對柱子是否可以反沖一直有爭論，那什么樣的柱子可以反沖，什么不可以。反沖后是正者用，還是反著用。具體到各型號柱子不僅是ODS柱，其他如正向柱、氨基柱、離子交換柱等最好都有解釋。
答：一般的正相反相柱應該都能反沖，只有兩端篩板孔徑不對稱的柱子不能反沖，不過目前這樣的柱子已經比較少見了。反沖是為了把柱頭的污染物沖洗掉，反沖后還是正著用比較好，以免柱子的兩頭都被污染。我們一直提倡的是：正向使用，反向沖洗。