色譜柱柱溫的影響

大多數分離工作是在室溫下進行的，如果實驗室的溫度保持不變的話沒什么問題，但大多數工作環境的溫度會有波動，這對方法的實驗室間重現性非常不利。溫度對等度分離的保留時間有影響，一般來說，每增加1℃，保留時間就減少1－3％。即使在溫度控制、日夜恒溫的環境下，由于晝夜溫差的影響，室溫也會發生較大的變化，特別是在進行大批量的樣品分析時（如人體藥代或生物等效性試驗），能使保留時間發生較大的變異。與等度洗脫相比，梯度洗脫的保留時間對溫度的變化較不敏感。 溫度的變化會引起色譜柱對所要分離物質選擇性的變化，這種變化取決于化合物的性質，所以可通過控制溫度來實現化合物的分離。色譜柱溫度平衡得不好，會使得峰展寬。柱溫變化，保留時間和柱選擇性發生變化，峰寬隨之變化，柱溫升高使得理論塔板數增大，峰變窄，靈敏度增高。如果色譜柱、溶劑瓶、泵和自動進樣器都在室溫下工作，則整個系統的溫度是一致的。如果對色譜柱進行加熱，而溶劑和系統的其它部分在室溫下工作，會使得色譜柱入口的溫度低于出口的溫度，這種溫度梯度對峰形不利。解決的辦法可以在自動進樣器與柱子之間加一個預熱器（preheater），如有些商品化的柱溫箱已經帶預熱器了。如此一來，有些峰展寬和峰拖尾的原因就比較好解釋了，色譜帶的前緣溫度高于后緣，所以移動的速度也就較快，因而產生峰展寬和峰拖尾?，F在使用預熱器來改善峰形是較普遍的方法。 

1、色譜柱的貯存： 

a、柱的貯存條件影響柱壽命，貯存液中至少應含有20％有機溶劑，以防止微生物的滋生； 

b、絕對不能用緩沖液貯存色譜柱； 

c、用5倍柱體積的不含緩沖液的流動相沖洗色譜柱以去除緩沖液和鹽。